追溯全自動血細胞分析儀的發(fā)展歷史,早在40年代末血細胞計數儀發(fā)明之初,其工作原理主要為電容法和光電法能量轉換原理進行細胞計數。電容法是改變兩電極間電容量獲得脈沖信號;后者是利用細胞和稀釋液對光吸收度不同,使光敏元件在細胞通過時產生脈沖信號方法,這兩種方法極易受外界環(huán)境干擾,因測試不敏感而逐漸被淘汰。50年代初,發(fā)明了電阻法,為以后全自動血細胞分析儀的迅速發(fā)展奠定了基礎,并在應用過程中不斷改進、完善。隨著近幾年來現(xiàn)代科學技術的發(fā)展,血液分析儀的工作原理也從單純的電阻法得到了突破性進展。目前臨床上使用的血細胞分析儀的工作原理主要有:①電阻法②激光散射法③混合型。
電阻法血球計數儀是基于血細胞是電導體這一特性而制成的,激光成型的寶石微孔浸在經過稀釋的細胞懸液中,經負壓吸引通過儀器的微孔,懸液中的細胞通過微孔,形成一個電阻而引起電壓的變化,產生相與通過微孔的血細胞的數量相等,而脈沖幅度的大小與血細胞體積的大小成正比,在檢測器后而相應的電子電路中對從微孔上檢測的脈沖信號進行放大、整形、再經過甄別器、分頻器和計數器,就可以分別得到RBC、WBC及分類的計數值,最后乘上一定的比例,就是標本的正確結果。一般半自動儀器分為紅細胞,血小板和白細胞、血紅蛋白兩個通道,血紅蛋白需加入溶血劑使白細胞按體積大小分為兩類或三類白細胞。
目前國內應用最多的是電阻法的儀器,因其具有結構簡單、操作方便、價格低能夠滿足一般血液檢驗的臨床要求,目前在國內普遍使用,其中半自動儀器由于取末梢血而簡單易行、成本低。但是全自動血細胞分析儀由于取靜脈血,大大提高精密度和準確度,自動化程度高和各項先進技術的應用,在以后的發(fā)展中必定會替代半自動分析儀而成為發(fā)展趨勢。
稀釋后的血液形成一個極細的液流穿過激光束,每個細胞被激光照射后產生光散射并被光電管接受,細胞的前向角散射與細胞的體積大小有關,側向角與細胞內部結構有關,細胞數量與脈沖次數相同,各種檢測信號被放大,識別后得到血液的各項指數,血紅蛋白測定同電阻型儀器原理。
激光散射型比電阻法儀器穩(wěn)定,不易受外電場干擾,但是儀器價格較高,市場占有率不高。