目前國內(nèi)使用的血細(xì)胞分析儀基本上是進(jìn)口產(chǎn)品且絕大部分采用電阻法。阻抗法計(jì)數(shù)細(xì)胞的原理是基于細(xì)胞在測(cè)試系統(tǒng)中產(chǎn)生的脈沖大小與儀器內(nèi)設(shè)定的閾值比較而得出的數(shù)據(jù),每個(gè)細(xì)胞檢測(cè)時(shí)顯示的脈沖大小除與細(xì)胞大小有關(guān)外(如粒細(xì)胞者最大,淋巴細(xì)胞最小),還與溶血?jiǎng)┑姆N類、稀釋液的滲透壓、離子強(qiáng)度、電導(dǎo)率、儀器出廠時(shí)儀器內(nèi)固定的孔電流和脈沖增益等諸因素有關(guān)。換言之,上述任一參數(shù)的變化,均可導(dǎo)致脈沖的變化,致使細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)的錯(cuò)誤。因此,欲得到準(zhǔn)確的結(jié)果,原則上應(yīng)使用原儀器的配套試制。但如果國內(nèi)開發(fā)出經(jīng)過了原裝試劑嚴(yán)格對(duì)照并經(jīng)科學(xué)鑒定認(rèn)可的自配試劑是可以使用的。自配試劑應(yīng)符合以下幾個(gè)條件。
(1)自制試劑在成分和劑量上與配套試劑可能不盡相同,但同一份血液在配套試劑體系(稀釋液+溶血?jiǎng)┡c自配試劑中細(xì)胞產(chǎn)生的脈沖信號(hào)應(yīng)是相同的,與血細(xì)胞分類直方圖應(yīng)是相附的,細(xì)胞分類結(jié)果應(yīng)一致,如達(dá)不到這一點(diǎn).不能代替進(jìn)口試劑。
(2)在血細(xì)胞、血小板測(cè)試系統(tǒng)中,紅細(xì)胞平均體積(MCV)、血小板平均體積(MPV)在兩種試劑中所得結(jié)果應(yīng)是相同的(如果儀器的計(jì)數(shù)閾值是可調(diào)的,至少應(yīng)在允許的變異范圍之內(nèi)),空白計(jì)數(shù)應(yīng)符合儀器的標(biāo)準(zhǔn)。
(3)溶血?jiǎng)┤芙庋?xì)胞的程度、速度,以及血紅蛋白與溶血?jiǎng)┳饔煤蟮奈展庾V與HiCN應(yīng)相似,吸收峰值最好在540nm。
(4)白配試劑的成分不應(yīng)損壞儀器的部件或影響其使用壽命。
血細(xì)胞分析儀細(xì)胞計(jì)數(shù)最適溫度為18-22℃,低于15℃,高于30℃,均對(duì)結(jié)果有影響。全自動(dòng)化儀器由于機(jī)內(nèi)自動(dòng)加入溶血?jiǎng)┎⒍〞r(shí)檢測(cè),可避免這個(gè)問題。但使用半自動(dòng)儀器進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),要在血液予以稀釋后加入溶血?jiǎng)?,溶血后進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù),因此溶血?jiǎng)┯昧考叭苎獣r(shí)間至關(guān)重要。加溶血?jiǎng)﹦┝坎蛔慊蚣雍蠓胖脮r(shí)問過短,致使溶血不完全;或時(shí)間太久,白細(xì)胞明顯變形(通常阻抗法儀器分類是以白細(xì)胞體積作為分類依據(jù)的,加溶血?jiǎng)┖蟀准?xì)胞膜溶解,胞漿大部分溢出,整個(gè)細(xì)胞體積縮小,僅留下核和部分顆粒),發(fā)生計(jì)數(shù)誤差,甚至儀器不能進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。